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葡聚糖凝膠玻璃柱的正確清洗步驟介紹

更新時間:2024-11-01瀏覽:224次
  葡聚糖凝膠玻璃柱是生物分離和純化領域中的一種重要工具,主要由葡聚糖凝膠作為固定相,填充于玻璃柱中。葡聚糖凝膠是由葡聚糖和甘油基通過交聯(lián)形成的三維網(wǎng)狀結構,具有分子篩性質(zhì),能夠依據(jù)分子量差異分離生物大分子,如蛋白質(zhì)、酶、核酸和多糖等。
 
  為了確保葡聚糖凝膠玻璃柱準確的分離結果和延長使用壽命,正確的清洗步驟是非常重要的。
 

 

  1、在開始清洗之前,需要將柱上的樣品轉移走,并用適當?shù)木彌_液進行沖洗,以確保樣品的去除,然后按照以下步驟進行清洗。
 
  2、預洗:將柱與一定量的去離子水連接,以去除柱內(nèi)的雜質(zhì)和殘留物。使用足夠的水量,確保柱內(nèi)的雜質(zhì)被沖洗掉。預洗時間一般為15-30分鐘,可以根據(jù)實際情況進行調(diào)整。
 
  3、酸堿清洗:使用酸性和堿性溶液進行清洗,以去除柱內(nèi)的有機和無機雜質(zhì)。首先,將柱與稀酸(如1MHCl)連接,讓其通過柱內(nèi)流動一段時間(通常為15-30分鐘)。然后,將柱與稀堿(如1MNaOH)連接,同樣讓其通過柱內(nèi)流動一段時間。這樣可以有效去除大部分的有機和無機雜質(zhì)。
 
  4、再生:柱內(nèi)的葡聚糖凝膠可能會因為多次使用而失去活性,需要進行再生。將柱與再生緩沖液(通常為1MNaCl)連接,讓其通過柱內(nèi)流動一段時間(通常為15-30分鐘)。再生緩沖液可以去除殘留的樣品和鹽類,并恢復柱的活性。
 
  5、再平衡:再生后,需要進行再平衡步驟,以確保柱內(nèi)的緩沖液和樣品達到平衡。將柱與平衡緩沖液(通常為20mMTris-HCl)連接,讓其通過柱內(nèi)流動一段時間(通常為15-30分鐘)。這樣可以使柱內(nèi)的緩沖液和樣品達到一致的條件。
 
  6、沖洗:使用足夠的去離子水進行沖洗,以確保柱內(nèi)的緩沖液和樣品被去除。沖洗時間可以根據(jù)實際情況進行調(diào)整。
 
  總之,葡聚糖凝膠玻璃柱通過預洗、酸堿清洗、再生、再平衡和沖洗,可以有效去除雜質(zhì)、恢復柱的活性,并確保柱內(nèi)的緩沖液和樣品達到一致的條件。正確的清洗步驟不僅可以保護其質(zhì)量,還可以提高實驗結果的準確性和重復性。

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